不溶性微粒檢查法顯微計數法適用於各種類型的注射劑,包括水溶液型、油溶液型、混懸液型和乳狀液型等。它不受製劑類型、顏色、粘度等因素的影響,因此具有廣泛的應用範圍,可以根據需要調整顯微鏡的放大倍數和視野範圍,以適應不同粒徑和數量的微粒檢測需求。此外,它還可以通過改變濾膜的類型和孔徑來控製檢測的靈敏度和特異性。
不溶性微粒檢查法顯微計數法的測定步驟:
1.實驗準備:
-確保實驗環境潔淨,無外來微粒幹擾。
-準備所需的儀器和試劑,包括顯微鏡、微孔濾膜及其濾器、平皿、淨化水、微粒檢查用水等。
-將所用的玻璃儀器和其他用品洗淨,必要時用適宜的溶劑衝洗,以除去微粒。
2.供試品準備:
-對於標示裝量為25ml或25ml以上的靜脈用注射液或注射用濃溶液,取供試品適量(至少4個樣品),用水將容器外壁洗淨,小心翻轉20次使溶液混合均勻。立即小心開啟容器,先倒出部分供試品溶液衝洗開啟口及取樣杯,再將供試品溶液倒入取樣杯中。
-對於標示裝量為25ml以下的靜脈用注射液或注射用濃溶液,取供試品適量(至少4個樣品),用水將容器外壁洗淨,小心翻轉20次使溶液混合均勻,靜置2分鍾或適當時間脫氣泡,小心開啟容器,直接將供試品容器置於取樣器上,開啟攪拌或以手緩緩轉動,使溶液混勻。
3.過濾與洗滌:
-在淨化台上,將濾器用淨化水衝洗至潔淨,用平頭無齒鑷子夾取符合要求的測定用微孔濾膜置濾器托架上,用濾器夾固定濾器,倒置,反複用淨化水衝洗濾器內壁,瀝幹後安裝在抽濾瓶上備用。
-抽取或量取供試品溶液適量(如25ml),沿濾器內壁緩緩注入經預處理的濾器中。靜置1分鍾,緩緩抽濾至濾膜近幹,再用微粒檢查用水適量(如25ml),沿濾器內壁緩緩注入,洗滌並抽濾至濾膜近幹。
4.顯微測量:
-用平頭無齒鑷子將濾膜移置平皿上(必要時,可塗抹極薄層的甘油使濾膜平整),微啟蓋子使濾膜適當幹燥後,將平皿閉合,置顯微鏡載物台上。
-調好入射光,放大100倍進行顯微測量,調節顯微鏡至濾膜格柵清晰。
-另取至少兩個供試品,同法測定,計算測定結果的平均值。